IVD原料質(zhì)量控制

體外診斷試劑原料是體外診斷行業(yè)的突破點(diǎn)。體外診斷產(chǎn)品的質(zhì)量很大程度上是由上游的IVD試劑原料決定的。
我國體外診斷試劑行業(yè)在我國起步較晚，屬于較新興產(chǎn)業(yè)，與歐美國家相比發(fā)展相對滯后。近幾年我國體外診斷試劑行業(yè)已從導入期步入發(fā)展期，市場(chǎng)需求快速增長(cháng)，國內企業(yè)抓住機遇，憑借產(chǎn)品性?xún)r(jià)比高和更為貼切本土市場(chǎng)的優(yōu)勢，不斷搶占市場(chǎng)份額，使原本以進(jìn)口產(chǎn)品為主導的原料市場(chǎng)格局被逐漸打破。隨著(zhù)國內體外診斷行業(yè)的迅速發(fā)展，創(chuàng )新、優(yōu)質(zhì)、穩定、大批量的體外診斷試劑原料公司異軍突起，且越來(lái)越受到體外診斷試劑廠(chǎng)商的重視和青睞。但由于行業(yè)競爭激烈，部分生產(chǎn)廠(chǎng)商為了壓縮生產(chǎn)成本從而降低了原料的質(zhì)量控制，是我國目前原料生產(chǎn)行業(yè)質(zhì)量參差不齊的重要因素。

那么，如何保證IVD原料的高質(zhì)量至關(guān)重要。以下內容主要是對抗原/抗體診斷原料的質(zhì)量控制進(jìn)行概述。

質(zhì)量控制

原料質(zhì)量控制：包括對于動(dòng)物源品質(zhì)的控制、培養基質(zhì)量的控制、生物安全性檢測等。IVD原料不是簡(jiǎn)單的制備蛋白，還需要考慮原料的特異性、靈敏度、批間差、純度等性能。

細胞庫質(zhì)量控制：（1）抗體診斷原料的制備離不開(kāi)雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在數次傳代后會(huì )出現活力逐步下降現象，若細胞株保存不善受到污染，對抗體原料的影響也很?chē)乐?。因此細胞株科學(xué)的保存、復蘇及傳代是非常必要的。（2）目前，少數的抗原抗體診斷原料生產(chǎn)廠(chǎng)家采用采用體外重組表達的方式獲得IVD原料，保證了原料的純度、批間差等性能。表達系統包括原核表達和哺乳動(dòng)物表達。

生產(chǎn)和純化：抗體原料的生產(chǎn)方式主要分為體內培養和體外培養兩種。體內培養是通過(guò)小鼠腹水培養而得，而體外培養則是通過(guò)生物反應器而得。由于動(dòng)物保護問(wèn)題和動(dòng)物個(gè)體間的潛在差異，體外培養生產(chǎn)抗體可能會(huì )成為主要的生產(chǎn)方式。目前原料的純化方式主要為親和層析和離子交換層析，其中對于單抗而言，主要以protein A/G 的親和層析為主；對于多抗，則以高純度的抗原親和層析為主；對于抗原，多以親和純化的方式。

出廠(chǎng)質(zhì)檢

在《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導原則》（征求意見(jiàn)稿）中對體外診斷試劑原料常規檢測項目進(jìn)行了概述：

外觀(guān)：肉眼觀(guān)察，大部分體外診斷試劑原料為澄清均一的液體，不含異物、渾濁或搖不散的沉淀或顆粒；或為白色粉末且不含有其他雜質(zhì)。

純度和分子量：主要方法是SDS-PAGE電泳后經(jīng)考馬斯亮藍或者銀染色法進(jìn)行染色，然后對條帶進(jìn)行掃描分析。此外，高效液相層析也可以用于純度和分子量測定。作為體外診斷試劑用的IVD原料，用銀染法染色后，純度一般要大于90%；用考馬斯亮藍染色后，純度一般都要大于95%。

蛋白濃度：主要測定方法為L(cháng)owry法、OD280nm光吸收法和雙縮脲法等。需要注意的是，不同方法學(xué)之間的結果存在一定差異，因此建議可以采取與原料廠(chǎng)商一致的方法進(jìn)行驗證。

抗體效價(jià)：效價(jià)的測定一般根據擔保含量測定結果，通過(guò)倍比稀釋法進(jìn)行。效價(jià)應達到規定的要求。

功能性：包括特異性、靈敏度、穩定性、批間差、精密度等功能性分析，并比較其與上一批次原料的相關(guān)性。

參考文獻

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［2］李耀華, 張世慶. 體外診斷試劑行業(yè)發(fā)展回顧與展望[J]. 檢驗醫學(xué)與臨床, 2017, 14(2):299-301.

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